高效液相色谱仪主要由色谱泵及控制器、进样器、色谱柱、检测器和数据处理及控制五大部分组成，分离原理是一个物理过程，流动相携带着待分析化合物和其他一些共存物质流过色谱柱，利用不同物质在固定相上的保留时间不同，从而出峰时间不同而达到分离，利用保留时间定性，峰高或者峰面积定量，在将分离后的各个成分依次通过一紫外检测器时就可检测出各化合物的浓度来。
二手高效液相色谱仪特点：“三高一广一快”
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，应对载液加高压。
2、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到zui佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
3、高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。
4、应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。
5、分析速度快、载液流速快：较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30 min，有些样品甚至在5min内即可完成，一般小于1h。此外HPLC还有色谱柱可反复使用、样品不被破坏、易回收等优点。
高效液相色谱仪的分离原理
根据分离原理的不同，高效液相色谱法可分为以下几种主要类型：液-液分配色谱法（LLC）﹑化学健合相色谱法﹑液-固吸附色谱法﹑离子交换色谱法﹑空间排阻色谱法等。
1、液-液分配色谱法（LLC）是基于样品组分中溶质在固定相和流动相之间的相对溶解度的不同而使组分在两相之间分配系数不同，进而分离的过程。
2、化学健合相色谱法是把固定液的有机基团通过化学反应键合在担体的表面上，从而克服固定液流失的现象，以达到分离的目的。
3、液-固吸附色谱法是根据样品中各组分吸附作用的不同而实现彼此分离的过程。
4、离子交换色谱法是利用离子交换原理与液相色谱技术结合的方法来测定溶液中阳离子和阴离子的。
5、空间排阻色谱法是把具有化学惰性的多孔物质作为固定相，使样品组分受固定相孔径大小的影响，将不同体积的分子进行分离的过程。
二手高效液相色谱仪应用领域
高效液相色谱法只要求样品能制成溶液，不受样品挥发性的限制，流动相可选择的范围宽，固定相的种类繁多，因而可以分离热不稳定和非挥发性的、离解的和非离解的以及各种分子量范围的物质。
与试样预处理技术相配合，HPLC所达到的高分辨率和高灵敏度，使分离和同时测定性质上十分相近的物质成为可能，能够分离复杂相体中的微量成分。随着固定相的发展，有可能在充分保持生化物质活性的条件下完成其分离。
HPLC成为解决生化分析问题zui有前途的方法。由于HPLC具有高分辨率、高灵敏度、速度快、色谱柱可反复利用，流出组分易收集等优点，因而被广泛应用到生物化学、食品分析、医药研究、环境分析、无机分析等各种领域。高效液相色谱仪与结构仪器的联用是一个重要的发展方向。
二手高效液相色谱在食品分析中的应用
在食品生产加工过程中，往往还会添加防腐剂﹑色素﹑甜味剂﹑保鲜剂等化学物质。它们的含量过高也将引起人类的健康问题。此外，由于我们所处环境的日益恶化，也会使食品沾染有害的微量元素来危害我们的身体健康。因此，高效液相色谱在食品分析中起到重大作用。
1、在食品中调味品的分析
高效液相色谱法也可以被用于食物调味品的分离分析。如J.D.BARANOWSKI报导了利用高效液相色谱法分离生姜辣味成分的方法。又如Bbathnanathic M和BuckleH.A报导了使用高效液相色谱法测定胡椒中胡椒碱含量的方法。
2、食品中有机酸的分离
食品中的有机酸是食品中酸味的主要来源，食品中有机酸的种类含量与构成对食品的味道有很大的影响。因此食品中有机酸的定性与定量分析不仅对食品营养研究意义重大，而且在食品生产过程的质量管理中也必不可少。HPLC应用于有机酸的测定时，要先将食品样品匀浆提取离心后，样液经0.3um滤膜抽滤，以（NH4）2HPO4—H3PO4缓冲液（pH=2.7）为流动相，用高效液相色谱法在C18色谱柱上分离，在波长210nm处经紫外检测器检测，用峰高或峰面积表示的标准曲线测定有机酸的含量。
3、食品中添加剂的分析
食品添加剂不仅种类繁多，功能各异，而且分类没有统一标准。因此，对添加剂的测定就提出了更加艰巨的要求。食品添加剂的测定同其他分析一样，首先要将其从复杂的混合物中分离出来，分离后再针对待测物质的物理﹑化学性质的不同来选择适当的分析方法。高效液相色谱在食品添加剂中的应用，不仅可以提高食品的质量以及营养价值，而且可以改善食品给我们带来的感观性质。食品添加剂可以防止食品变质，提高保藏期限，给我们提供美味的口感。我们可以用高效液相色谱法对甜味剂中糖精钠的含量进行测定。制备糖精钠的标准储备液和糖精钠的标准使用液，将样品微热搅拌，并加入氨水（1+1）调试pH=7，以甲醇-乙酸铵溶液（0.02mol/L）（5+95）作为流动相制备色谱柱，取样品处理液和标准使用液各10uL，注入高效液相色谱仪进行分离，以标准溶液的保留时间为依据进行测定，以其峰面积求出样液中被测物质的含量。
4、食品中糖类的分离分析
淀粉是一种多糖，它广泛存在于植物的根﹑茎﹑叶﹑种子等组织中，是人类食物的重要组成部分，同时也是供给人体热量的主要来源。淀粉是由葡萄糖单位构成的聚合体，其水解产物为单糖。我们可以用高效液相色谱法对小麦淀粉的水解产物进行分析。
5、食品中维生素的分离分析
维生素是人和动物为维持正常的生理功能而需从食物中获得的一类微量有机物，在人体的生长代谢和发育过程中发挥着重要的作用。在测定脂溶性维生素时，通常要先用皂化法处理样品，用水洗去除类脂物，然后用有机溶剂提取脂溶性维生素，浓缩后溶于适当的溶剂后测定。
6、在其他食品分析中的应用
HLPC不仅仅是应用在以上领域，还可以广泛用于食品药品残量的检测，食品中违禁成分的检测以及食品中营养成分的分离与分析。彭锦峰建立了用高效液相色谱测定食用香菇中甲醛的方法。王帆等键立了用高效液相色谱检测保健食品中大豆异黄酮的方法。这些方法的研究和实验，使高效液相色谱在食品中的应用得以发展，为日后高效液相色谱在食品分离与分析中的广泛应用提供了依据。
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